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Grundlagen  Leitkeimidentifizierung 
Identifizierung mit Enzymnachweisen

Pro Tablette werden 250µl Suspension (McFarland Nr. 4 in physiologischer NaCL) benötigt.
Die "Bunte Reihe" für die Gattungen Bacteroides, Prevotella, Porphyromonas und Fusobacterium enthalten maximal vier Einzelenzyme, sodass die Ursprungssuspension mindestens 1ml (McFarland Nr. 4) enthalten soll.
Je 250 µl werden dann in die Reaktionsgefässe (Schraubverschlusscups) eingebracht, die entsprechende Tablette dazugegeben und verschlossen.

Zusammensetzung der "Bunten Reihe" bei Leitkeimidentifizierung der einzelnen Gattungen

Enzymnachweis

Bacteroides (Indolnegativ)

Prevotella spp.

Fusobacterium spp.

Porphyromonas spp.

Eskulinhydrolyse
+
+


a-Fucosidase (a-Fuc)
+
+

+
ß-Glucosidase (ß-Gluc)
+



a-Galactosidase (a-Gal)

+


ß-Xylosidase (ß-Xyl)

+


Alkalische Phospatase (AlkP)


+

ß-N-Acetyl- glucosaminidase



+

Indol

+

+

+

+

Katalase

+

+

 

 

 


Anschließend wird für vier Stunden bei 36°C inkubiert und danach abgelesen.

Bewertung der Enzymreaktionen

Enzymnachweis

Positiv

negativ

Eskulinhydrolyse

Schwarz/grau

Farblos/hellgrau

a-Fucosidase (a-Fuc)

Gelb

Farblos

ß-Glucosidase (ß-Glu)

Gelb

Farblos

a-Galactosidase (a-Gal)

Gelb

Farblos

ß-Xylosidase (ß-Xyl)

Gelb

Farblos

Alkalische Phosphatase (AlkP)

Deutliches Gelb*

Farblos oder schwach gelb

ß-N-Acetylglucosaminidase (NAG)

Deutliches Gelb

Farblos oder schwach gelb

*Inkubation länger als vier Stunden führt zu falsch positiven Ergebnissen


Das Testergebnis wird auf Protokollbögen, auf denen die entsprechenden Gattungsdifferentialtabelle aufgetragen werden kann, protokolliert und das Identifizierungsergebnis abgelesen

 

Copyright by L.T. Zabel, 2005