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Anaerobier-Gattungen  Gattung Bacteroides  ETBF 
ETBF
Einige Isolate von B. fragilis sind in der Lage ein 20 kDa großes Metalloprotease-Toxin zu bilden und zu sekretieren. Die Wirkung entfaltet sich extrazellulär und führt u.a. über eine Proteolyse der Tight-Junction-Proteine zu einem Verlust der epithelialen Barrierefunktion. Dabei verursacht es eine Schwellung der menschlichen Colon-Epithelzellen, ohne die Zellen direkt zu schädigen. Intrazellulär findet eine Umverteilung der Actinfilamente statt. Neben den enterotoxischen Wirkungen scheint das Fragilysin noch weitere, bislang unbekannte pathologische Effekte zu besitzen, da auch bei 23% von B. fragilis-Isolaten aus extra-abdominalen Infektionsprozessen, insbesondere bei Blutkultur-Isolaten, eine Toxin-produktion nachweisbar ist.

ETBF wurden erstmals 1984 von Myers et al. beschrieben. Die Autoren wiesen bei abgebundenen Ileusschlingen von Kälbern und Lämmern einen sekretorischen Effekt nach. Später wurden solche Stämme in Assoziation mit Diarrhoe bei jungen Haustieren isoliert (Myers et al., 1987a, 1987b, 1989) 1987 wurden erstmals Isolate bei Menschen, Erwachsene und Kinder mit akuter und chronischer Diarrhoe beschrieben (Myers et al. 1987c). Die Besiedlung durch ETBF findet meist im frühen Kindesalter statt. Das in der Regel selbstlimitierend und gutartig verlaufende Krankheitsbild tritt gehäuft bei Kindern zwischen dem 1. und 5. Lebensjahr auf In einer kontrollierten Studie zeigte sich eine strenge Assoziation zwischen akuter Diarrhoe und ETBF bei Kindern, die älter als ein Jahr waren (Sack et al. 1992).

Eine jüngere Untersuchung an Kindern aus Bangladesch wies eine saisonale Häufung in den Sommermonaten auf. Erwerb von ETBF und Diarrhoe zeigten eine Korrelation mit Hühner- und Rinderhaltung, sodass diese als Risikofaktoren für die Erkrankung durch ETBF (Pathela et al., 2005) gesehen werden muss.

ETBF-PCR nach Shetab et al. 1998
Material: Stuhl
Methode: Nachweis des Toxingens mittels nested-PCR
Primer:
innen:

Produktgöße 367bp

außen:

Produktgröße 290bp

RS3 TGA AGT TAG TGC CCA GAT GCA GG
RS4 GCT CAG CGC CCA GTA TAT GAC C


RS1 TGC GGC GAA CTC GGT TAA TGC
RS2 AGC TGG GTT GTA GAC ATC CCA CTG G

B.fragilis-enterotoxin (2K)
Ansätze:

1. Runde 2. Runde Reaktionsbedingungen:
RS30,1
RS10,1

94°


94°


60°


72°


72°




2 min


30 sec


30 sec


30 sec


5 min


Pause


Zyklen (1K)

 

RS40,1
RS20,1
Taq (1u/µl)0,5
Taq (1u/µl)0,5
dNTP1
dNTP1
Puffer (+MgCl2)2,5
Puffer (+MgCl2)2,5
Wasser18,3
Wasser20,3
Summe22,5
Summe24,5



Literatur: Shetab et al. 1998, J Clin Microbiol 36, 1729-1732
Copyright by L.T. Zabel, 2005